Uji aliran lateral dan sejarah singkat

Itu uji aliran lateral (LFT) adalah uji yang juga dikenal sebagai perangkat aliran lateral (LFD), uji imunokromatografi aliran lateral, atau uji cepat. Ini adalah perangkat sederhana yang dirancang untuk mendeteksi keberadaan zat target dalam sampel cair tanpa perlu peralatan khusus dan mahal. LFT banyak digunakan untuk diagnostik medis di rumah, point-of-care, dan laboratorium. Misalnya, rumah Tes Kehamilan adalah LFT yang mendeteksi hormon spesifik. Tes ini sederhana dan terjangkau, dan biasanya menunjukkan hasil sekitar lima hingga tiga puluh menit. Banyak aplikasi berbasis laboratorium meningkatkan sensitivitas LFT sederhana dengan menggunakan peralatan khusus tambahan. Biasanya antigen biologis, banyak uji aliran lateral adalah tes antigen cepat (tikus atau ART).LFT beroperasi pada prinsip yang sama dengan kromatografi afinitas dalam uji immunosorbent yang terkait dengan enzim (ELISA). Pada dasarnya, tes -tes ini menjalankan sampel cair di sepanjang permukaan bantalan dengan molekul reaktif, menunjukkan hasil positif atau negatif secara visual. Bantalan ini didasarkan pada serangkaian lapisan kapiler seperti lembaran kertas berpori polimer mikro atau polimer yang disinter. Bantalan memiliki kemampuan untuk mengangkut cairan secara spontan (mis. Urin, darah, air liur).Pad sampel bertindak sebagai spons dan memegang kelebihan cairan sampel. Setelah merendam, cairan mengalir ke bantalan konjugat kedua, di mana produsen menyimpan partikel bioaktif kering-beku yang disebut konjugat (lihat di bawah) dalam matriks gula garam. Berisi semua reagen yang diperlukan untuk mengoptimalkan reaksi kimia antara molekul target (mis. Antigen) dan mitra kimianya yang diimobilisasi pada permukaan partikel (mis. Antibodi). Ini menandai partikel yang menarik ketika mereka melewati pad dan melanjutkan ke seluruh pengujian dan Garis kontrol. Garis uji menunjukkan sinyal, biasanya warna dalam tes kehamilan. Garis kontrol berisi ligan afinitas dan menunjukkan apakah sampel mengalir melalui dan biomolekul dalam bantalan terkonjugasi aktif. Setelah melewati zona reaksi ini, Cairan memasuki bahan berpori terakhir, sumbu, yang hanya bertindak sebagai wadah limbah.LFT dapat dilakukan sebagai uji kompetisi atau sandwich.

Sejarah

LFT berasal dari kromatografi kertas, yang dikembangkan oleh Martin dan Synge pada tahun 1943 dan dielaborasi oleh Consden, Gordon dan Martin pada tahun 1944. Setelah 1945, aktivitas di bidang ini meledak. Teknik ELISA dikembangkan pada tahun 1971. Beginning pada tahun 1988, Armkel LLC mengajukan sekelompok paten LFT, termasuk gugatan yang dijelaskan di bawah US 6.485.982

Ringkasan

Partikel berwarna

Pada prinsipnya, setiap partikel berwarna dapat digunakan, tetapi lateks (biru) atau partikel emas berukuran nano (merah) paling umum digunakan. Partikel-partikel gold tampak merah karena resonansi plasmon permukaan yang terlokalisasi. Partikel berlabel magnet atau magnetik juga dapat digunakan, Tetapi ini membutuhkan penggunaan pembaca elektronik untuk mengevaluasi hasil tes.

Tes sandwich

Metode sandwich biasanya digunakan untuk analit yang lebih besar karena mereka cenderung memiliki beberapa situs pengikatan. Karena sampel bermigrasi melalui pengujian, pertama kali bertemu konjugat, antibodi spesifik untuk analit yang diminati dengan label visual, biasanya emas koloid. Antibodies mengikat dan bermigrasi dengan analit target dalam sampel sampai mereka mencapai garis uji. Garis uji juga mengandung antibodi yang diimobilisasi khusus untuk analit yang menarik yang mengikat molekul terkonjugasi yang terikat analit. kemudian menunjukkan perubahan visual, mengkonfirmasi keberadaan molekul target. Sebagian besar uji sandwich juga memiliki garis kontrol yang hadir terlepas dari ada atau tidak adanya analit yang menarik untuk memastikan fungsi yang tepat dari bantalan aliran lateral. Cepat, rendah ini rendah Tes berbasis sandwich-sandwich umumnya digunakan dalam tes kehamilan di rumah untuk mendeteksi gonadotropin korionik manusia (HCG) pada urin wanita hamil.

Uji kompetitif

Uji kompetitif biasanya digunakan untuk analit yang lebih kecil karena analit yang lebih kecil memiliki lebih sedikit situs pengikatan. Sampel pertama kali bertemu antibodi yang diarahkan terhadap analit target yang berlabel dengan label visual (partikel berwarna). Garis uji berisi analit bunga yang diimobilisasi pada permukaan. Yang menarik tidak ada dalam sampel, antibodi yang tidak terikat akan berikatan dengan molekul analit yang diimobilisasi ini, yang berarti penanda visual akan ditampilkan. ke analit yang diimobilisasi di garis uji, jadi tidak ada penanda visual yang ditampilkan. Ini berbeda dari analisis sandwich karena tidak adanya band berarti analit hadir.

Tes kuantitatif

Sebagian besar LFT dirancang untuk beroperasi berdasarkan kualitatif murni. Namun, kekuatan garis uji dapat diukur untuk menentukan jumlah analit dalam sampel. Beberapa perusahaan menggunakan perangkat diagnostik genggam yang disebut pembaca aliran lateral untuk memberikan hasil uji kuantitatif yang sepenuhnya. Dengan menerangi dengan panjang gelombang cahaya yang unik yang dikombinasikan dengan CMOS atau teknologi deteksi CCD, gambar yang kaya sinyal dari garis uji aktual dapat dihasilkan. Menggunakan algoritma pemrosesan gambar yang dirancang untuk jenis uji dan media tertentu, intensitas garis kemudian dapat dikorelasikan dengan konsentrasi analit analit . Detekt Biomedis L.L.C.Man Manufaktur Salah satu platform perangkat lateral genggam seperti itu. Teknik non-optik alternatif juga mampu melaporkan hasil kuantitatif. Salah satu contohnya adalah format LFT dari magnetic immunoassay (MIA) yang juga memungkinkan hasil kuantitatif yang diperoleh. Pengurangan variasi dalam magnetik (MIA) yang juga memungkinkan hasil kuantitatif yang diperoleh. Pengurangan variasi dalam magnetik (MIA) yang juga memungkinkan hasil kuantitatif yang diperoleh. Pompa kapiler dari cairan sampel adalah cara lain untuk beralih dari hasil kualitatif ke kuantitatif. Misalnya, pekerjaan terbaru telah menunjukkan bahwa pemompaan kapiler memiliki laju aliran konstan terlepas dari viskositas cair dan energi permukaan.