Alat Antigen Rapid: Pengetahuan Dasar Deteksi Asam Nukleat - Bagian 2

Alat Antigen Rapid: tahu deteksi asam nukleat

Real time pcr kuantitatif fluoresensi

Teknologi PCR kuantitatif fluoresensional waktu nyata mengacu pada metode penambahan gugus neon ke sistem reaksi PCR, menggunakan sinyal fluorescent untuk memantau seluruh proses PCR secara real time, dan akhirnya secara kuantitatif menganalisis template yang tidak diketahui melalui kurva standar.

Prinsip teknologi ini adalah untuk menandai probe dengan kelompok fluoresen, menandai kelompok fluorescent di ujung 5 'dan tandai grup pendinginan Qdi ujung 3 '. Ketika tidak ada amplifikasi PCR, kelompok fluoresen padam dan tidak memancarkan fluoresensi karena jarak spasial yang dekat antara kelompok fluoresen dan kelompok pendinginan; ketika PCR diperkuat, primer dan fluorescent berlabel probe spesifik digabungkan pada template pada saat yang sama. Posisi pengikatan antara probe berlabel fluorescent dan template terletak di antara primer hulu dan hilir. Probe fluorescent dihidrolisis dengan menggunakan 5 '3' aktivitas exonuclease dari enzim taq, dan kelompok fluorescent dilepaskan. Karena dipisahkan dari kelompok pendinginan di ruang angkasa, ia memancarkan fluoresensi. Fluoresensi yang dipancarkan dapat dideteksi oleh penyelidikan fluoresensi, diperkuat dan dideteksi pada saat yang sama, sehingga untuk mewujudkan deteksi \"real-time \". Teknologi ini tidak Hanya menyadari lompatan PCR dari semi kuantitatif ke kuantitatif, tetapi juga memiliki karakteristik spesifisitas yang kuat, tingkat otomatisasi yang tinggi dan secara efektif menyelesaikan masalah polusi pcr dibandingkan dengan PCR konvensional.

Deteksi DNA Strand bercabang - BDNA

BDNA adalah metode untuk deteksi kuantitatif RNA tipe 1 HIV dalam plasma.bdna mengacu pada fragmen DNA sintetis dengan rantai samping. Setiap rantai samping dapat diberi label dengan spidol yang bersemangat. RNA HIV dilepaskan dari partikel virus dengan sentrifugasi, dan kemudian ditangkap ke dalam mikropor dengan capture probe

Secara khusus mengikat bagian lain dari virus RNA dan juga mengikat ke probe yang diperkuat sebelumnya. Yang terakhir kemudian dihilangkan dengan penyelidikan amplifikasi, probe bdna. Dua set probe target secara khusus mengikat ke berbagai daerah dari virus RNA.Hivrna oligonukleotida kompleks dibentuk dalam mikropores. Sinyal chemiluminescence dapat diperkuat setelah inkubasi dengan substrat chemiluminescence. Diukur dengan intensitas bercahaya, yang sebanding dengan konten HIVRNA dalam sampel Dibandingkan dengan PCR.BDNA memiliki puluhan probe yang meliputi seluruh genom, yang dapat dengan mudah mendeteksi beberapa varian HIV, tetapi sensitivitasnya tidak sensitif dengan PCR. Meningkatkan sensitivitas BDNA adalah kesulitan utama.

Langkah deteksi

Proses deteksi teknologi deteksi kualitatif asam nuklap HIV dibagi menjadi ekstraksi asam nukleat, sintesis transkripsi terbalik CDNA, reaksi amplifikasi PCR, analisis kualitatif produk amplifikasi, hasil penilaian dan laporan penyelesaian.